Metode : Burry
Tujuan : Untuk melihat kapsul bakteri
Prinsip : Kapsul akan berwarna transparan dan sel bakteri berwarna merah/biru sesuai dengan cat yang diberikan,apabila kuman berkapsul dicat dengan pengecatan burry,latar belakang hitam.
Alat bahan :
- Obyek glass
- Deck glass
- Pembakar spirtus
- Mikroskop + emersi oil
- Gram A
- ohse
Prosedur :
• Persiapkan objek glass yang bersih dan bebas lemak
• Letakkan 1 tetes tinta cina pada bagian pinggir objek glass
• Diambil 1-2 ose suspensi bakteri secara aseptis, campurkan dengan tinta cina sampai homogen
• Dengan ujung deck glass, buat hapusan, dibiarkan kering dan fiksasi
• Ditambahkan gram A selama 2-5 menit
• Sisa cat dibuang, cuci hati-hati dengan air mengalir dan dikeringkan..
• Diperiksa dibawah mikroskop perbesaran 1000x
• Persiapkan objek glass yang bersih dan bebas lemak
• Letakkan 1 tetes tinta cina pada bagian pinggir objek glass
• Diambil 1-2 ose suspensi bakteri secara aseptis, campurkan dengan tinta cina sampai homogen
• Dengan ujung deck glass, buat hapusan, dibiarkan kering dan fiksasi
• Ditambahkan gram A selama 2-5 menit
• Sisa cat dibuang, cuci hati-hati dengan air mengalir dan dikeringkan..
• Diperiksa dibawah mikroskop perbesaran 1000x
Hasil :
Kesimpulan : ditemukan bakteri bentuk batang memiliki organelle kapsul berwarna transparan
Pembahasan :
- Kapsul merupakan lapisan disekeliling sel yang merupakan hasil sintesa polimer ekstrasel (polisakarida) yang berkondensasi.
- Komponen utama kapsul adalah air, bahan organik yang berupa homo-polisakarida (misalnya selulosa, dekstran) atau heteropolisakarida (misalnya alginat), kandungan zat kimia yang ada tergantung dari spesies, biasanya kapsul tersusun dari polisakarida atau polipeptida.
- Kapsul dapat dibedakan atas:
1. Makrokapsul yang dapat dilihat dengan mikroskop cahaya biasa.
2. Mikrokapsul yang hanya dapat dilihat dengan mikroskop elektron.
3. Lapisan lendir (slime slayer),sekresi sel seperti air yang beradhesi pada dinding sel dengan daya lekat yang lemah. Lapisan ini akan berdifusi kedalam medium jika sel ditumbuhkan pada medium cair.
- Ketebalan kapsul cukup bervariasi,pada beberapa jenis kapsul ini sangat tipis sehingga dapat dideteksi dengan analisis kimia.
- Komposisi kapsul adalah konstant pada galur beberapa bakteri tertentu, tetapi sangat bervariasi bahkan antar organisme yang diklasifikasikan dalam satu marga dan jenis. Umpamanya kapsul berbagai tipe S.Pneumonia semuanya tertsusun dari molekul yang sangat besar dengan bobot molekul mendekati satu juta.Namun jika bahan penyusun kapsul diisolasi dan dihidrolisis (pemutusan ikatan kimia dengan penyisipan air) polisakarida menjadi monosakarida-monosakarida komponennya,akan diperoleh gula dengan berbagai tipe. Ada kecendrungan bahwa kapsul tidak mudah menerima zat warna,karena itu jarang ditemui pada polesan yang diwarnai secara rutin.Namun, kapsul dapat dilihat pada preparat basah (suspensi pada cairan) organisme tertentu.
- Fungsi dari kapsul itu sendiri yaitu :
a. Pelindung sel dari faktor lingkungan yang merugikan(Protections)
b. Mencegah kekeringan.
c. Pencegah infeksi oleh bakteriofage.
d. Penghalang serta penyaring terhadap ion logam beracun
e. Cadangan makanan terdiri dari polysakarida (gula sederhana, gula amina,asam gula dan campurannya
f. Perlekatan (misal plak pada gigi).
g. Membantu sel dalam menghindari fagositosis.
h. Kapsul mempunyai hubungan yang erat dengan virulensi bakteri tersebut, terlihat pada bakteri patogen.
- Kapsul bakteri penting artinya bagi bakteri itu sendiri maupun bagi organisme lain. Kapsul selain berfungsi seperti diatas, juga berfungsi untuk menginfeksi karena adanya kapsul bakteri-bakteri penyebab penyakit tertentu. Kehilangan virulensinya dan dengan demikian kehilangan kemampuan menyebabkan infeksi, semua ini disebabkan oleh hilangnya kapsul.
- Dampak lain bakteri yang berkapsul adalah adanya gangguan seperti lendir dalam beberapa proses industri. Penumpukan lendir dalam peralatan pabrik dapat menyumbat filter membentuk lapisan yang tidak dikehendaki pada pipa-pipa atau peralatan lain, dan atau mempengaruhi kualitas produk akhirnya
- Ada beberapa metode pengecatan kapsul, diantaranya:
1. Metode buri
Cat yang dipakai:-Nigrosin
-Methilene Blue
2. Metode Hiss
Cat yang dipakai:-basic Fucsin (dengan pencuci alcohol)
3. Metode Welch
Cat yang dipakai:-carbol fuchsin ( dengan pencuci NaCl)
4. Metode Antony
Cat yang dipakai:-kristal violet (dengan pencuci CuSO4)
- Kemampuan menghasilkan kapsul merupakan sifat genetis, tetapi produksinya sangat dipengaruhi oleh komposisi medium tempat ditumbuhkannya sel-sel yang bersangkutan. Komposisi medium juga dapat mempengaruhi ukuran kapsul.
- Contoh bakteri berkapsul :
Ø Klebsiella pneumonia
Ø Seratia marcescens
Ø Bacillus subtilis
Ø Diplococcus pneumonia
Ø Pneumococcus pneumonia
- Kapsul tidak dapat diwarnai karena kapsul yang berupa cairan lender mempunyai daya afinitas yang besar terhadap cat, sehingga tidak mudah menyerap zat warna ( kapsul berwarna transparan)
Sumber pustaka :
0 komentar:
Posting Komentar