PENGECATAN ZN

    Ziehl Neelsen (ZN) merupakan metode yang digunakan untuk mengetahui adanya Basil Tahan 

Asam (BTA)

Disebut BTA sebab dinding bakteri tahan terhadap pencucian dengan asam & alkohol

Dengan metode pengecatan Gram, bakteri dapat dikelompokkan menjadi 2, yaitu Basil Tahan

Asam (BTA +) dan Basil yang tidak Tahan Asam (BTA -) berdasarkan reaksi atau sifat bakteri 

terhadap cat tersebut. 

Sifat bakteri tersebut disebabkan oleh asam mikolat yang terikat pada dinding sel.

Susunan dinding sel BTA: peptidoglikan, arabinogalaktan, & lipid

50% dari lipid ini adalah asam mikolat

Termasuk dalam Pewarnaan Differensial

Tujuan:

vUntuk membedakan antara bakteri yang bersifat BTA (+) dan BTA (-)

vUntuk mengetahui berat ringannya penyakit

vUntuk mengetahui berhasil tidaknya pengobatan

Prinsip:

vGram (+): Bakteri mengikat kuat cat utama (ZN A), tidak luntur oleh cat peluntur (ZN B) & tidak

mengikat kuat cat lawan (ZN C) sehingga sel bakteri berwarna merah

vGram (-): Bakteri tidak mengikat kuat cat utama (ZN A), luntur oleh cat peluntur (ZN B) & mengikat kuat cat lawan (ZN C) sehingga sel bakteri berwarna biru.

Alat dan Bahan : 

 Pembakar spirtus

Objek Glass

Lidi dan tusuk gigi

Minyak emersi

Cat ZN (A, B, & C)

Pasir Alkohol

Mikroskop

Prosedur : 

1.Sediakan Objek glass yang bersih kering dan bebas lemak – (Objek Glass Forsted)

2.Pemberian kode pada ujung objek glass

3.Ambil sampel (sputum) dengan lidi (± sebesar biji kedelai)

4.Ratakan sampel di tengah objek glass hingga membentuk oval dengan ukuran  3 x 2 cm 

5.Masukkan lidi yang telah digunakan ke dalam pasir alkohol 

6.Tunggu preparat hingga setengah kering 

7.Lakukakan pengukiran (coiling) pada preparat dengan menggunakan tusuk gigi secara radial/melingkar

    hingga kering (hentikan coiling jika preparat telah kering) 

8.Fiksasi dengan melewatkan preparat di atas pembakar spirtus sebanyak 3 x

Pengecatan ZN 

1.Genangi preparat dengan cat ZN A

2.Panasi dengan pembakar spirtus hingga keluar uap (jangan sampai mendidih), biarkan selama 5 menit

3.Buang sisa cat ZN A, cuci dengan air mengalir melalui tepi objek glass

4.Genangi dengan ZN B (Dekolorisasi), biarkan selama 10 – 15 menit (ulangi prosedur ini jika dekolorisasi

    belum sempurna)

5.Buang sisa cat ZN B, cuci dengan air mengalir melalui tepi objek glass

6.Genangi dengan ZN C, biarkan selama 10 – 20 detik

7.Buang sisa cat ZN C, cuci dengan air mengalir melalui tepi objek glass

8.Kering anginkan, amati dibawah mikroskop dengan perbesaran 1000 x